辣椒粉中羅丹明B含量測(cè)定的整體解決方案—BJS 201905

基質(zhì)：辣椒粉

樣品提取：

試樣前處理提取：準(zhǔn)確稱(chēng)取1 g（精確至0.01 g）試樣置于50 mL塑料離心管中，準(zhǔn)確加入10.0 mL含0.1%甲酸的甲醇水(1:1)溶液，混勻，加入陶瓷均質(zhì)子兩顆，于旋渦混勻器上渦旋15 min，于8000 r/min離心10 min，取3 mL提取液層溶液過(guò)0.45 μm PTFE親水濾器后待凈化。

SPE小柱操作：

SPE：CNW Poly-Sery MCX SPE小柱(粒徑40 um，60 mg/3 mL）（貨號(hào)：SBEQ-CA3279）；

活化：3 mL 甲醇，

平衡：3 mL 水，

凈化：準(zhǔn)確移取1.0 mL提取液

淋洗：3 mL 0.1%甲酸水溶液、3 mL水、3 mL甲醇

洗脫：6 mL 5%氨水甲醇溶液

并收集洗脫液，洗脫溶液在45°C下，用氮?dú)獯抵两桑瑲堅(jiān)?.0 mL 含0.1%甲酸的35%乙腈水溶液溶解，過(guò)0.45 μm PTFE親水濾器（貨號(hào)：SCAA-113）上機(jī)測(cè)定。

加標(biāo)樣品：

加標(biāo)水平0.1 μg/g（對(duì)應(yīng)上機(jī)溶液濃度10ng/mL）：稱(chēng)取樣品后，加入羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)使用溶液（1 μg/mL） 0.1mL，后續(xù)操作同上；

加標(biāo)水平0.5 μg/g（對(duì)應(yīng)上機(jī)溶液濃度50ng/mL）：稱(chēng)取樣品后，加入羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)中間液（10 μg/mL） 0.05mL，后續(xù)操作同上；

前處理注意事項(xiàng)：前處理過(guò)程中提取液需過(guò)濾后再過(guò)SPE小柱；含5%氨水的甲醇溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。

液相色譜

a) 色譜柱：C18柱，4.6 mm×150mm，粒徑5 μm（貨號(hào)：LAEQ-461571）。

b) 流動(dòng)相：A為0.1%甲酸水溶液，B為乙腈，

c) 流速：1.0 mL/min。

d) 柱溫：35°C。

e) 進(jìn)樣量：10 μL。

f）激發(fā)波長(zhǎng)：550 nm；發(fā)射波長(zhǎng)：580 nm；梯度洗脫程序見(jiàn)表3

圖1 羅丹明B標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖（10 ng/mL）

圖2 樣品加標(biāo)（上）和樣品空白（下）疊圖譜圖（樣品加標(biāo)10 ng/mL）

4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)

以標(biāo)曲的峰面積與標(biāo)曲上機(jī)濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 1637.7x - 86.745，R2 = 0.9999

4.2 加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)

辣椒粉樣品的加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)見(jiàn)下表。

表1 辣椒粉基質(zhì)的加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)n=3

使用安譜實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品和相關(guān)耗材，參照《BJS 201905 食品中羅丹明B的測(cè)定》，對(duì)于辣椒粉樣品中羅丹明B進(jìn)行檢測(cè)，加標(biāo)回收率在90%左右，RSD均小于5%，該方法操作簡(jiǎn)便穩(wěn)定。安譜實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)品和相關(guān)耗材能夠很好的滿足辣椒粉等基質(zhì)中羅丹明B含量的檢測(cè)。